微特森常温培养基正式发布

2025-02-08 13:16 Witcel微特森

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在细胞培养领域,冷链运输与储存犹如一道紧箍咒,牢牢束缚着科研人员的手脚。稍有不慎,温度的波动就可能导致培养基性能大打折扣,细胞培养功亏一篑。witcel 微特森研发的常温培养基,宛如一场及时雨,打破了这一僵局。

研发团队历经无数次艰苦探索,攻克重重技术难关,创新性地采用了独特的稳定配方。这不仅有效保护了培养基中的关键营养成分,使其在常温下依然能够保持稳定活性。
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常温细胞培养基与普通培养基相比的优势

储存便利
  • 无需冷藏:常温细胞培养基可在室温下长时间保存,不像普通培养基一般需要冷藏储存,节省了冰箱空间,尤其对于冰箱空间有限的实验室来说非常实用。
  • 稳定性高:对储存环境的温度要求不严格,在常温下能保持良好的稳定性,不易因温度波动而出现成分变化或变质等问题。
经济高效
  • 能源成本低:由于不需要冷藏设备来维持储存温度,节省了能源消耗,降低了实验室的运行成本。
  • 减少浪费:其稳定性和较长的保质期有助于减少因培养基过期或变质而导致的浪费,对于使用量较小或使用频率不高的实验室来说,能够更好地控制成本。

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胞培养基选择指南

细胞培养基选择指南
  1. 根据细胞类型选择
    • 贴壁细胞:如果培养贴壁细胞,如成纤维细胞等,MEM、DMEM 等基础培养基较为常用。其中,DMEM 的营养成分浓度相对较高,适合大多数贴壁细胞的生长;而对于一些对营养需求不高或对环境较为敏感的贴壁细胞,MEM 可能是更合适的选择。
    • 悬浮细胞:例如淋巴细胞、白血病细胞等悬浮细胞,RPMI-1640 是较为常用的培养基,其成分能够满足悬浮细胞的生长需求,并且缺乏钙离子,对细胞的贴壁促进作用不明显,有利于悬浮细胞的生长和维持。
    • 原代细胞:原代细胞的培养通常需要更为复杂的营养成分和特殊的生长因子。例如,McCoy’s 5A 培养基广泛用于多种原代细胞的培养,如来源于骨髓、皮肤、脾脏、肾脏和肺等组织的哺乳动物原代细胞。
  2. 考虑实验目的
    • 常规培养:对于一般的细胞培养实验,选择常用的基础培养基,并根据细胞的类型和生长特性添加适量的血清等补充成分即可。
    • 特殊研究:如果进行特定的实验研究,如细胞转染、基因表达调控等,可能需要选择特殊的培养基。例如,在进行转染实验时,MEM 培养基可以在短时间内替代完全培养基来培养细胞,因为它的成分相对简单,对转染过程的干扰较小。
  3. 关注培养基成分
    • 营养成分:确保培养基含有细胞生长所必需的氨基酸、维生素、无机盐等营养成分,并且这些成分的浓度适合所培养的细胞。例如,高糖型 DMEM 中的葡萄糖浓度较高,适合生长速度快、能量需求大的细胞;而低糖型 DMEM 则适用于对葡萄糖浓度有特殊要求的细胞。
    • pH 值缓冲系统:大多数细胞需要在略微酸性的环境中生长,但不同细胞对 pH 值的耐受范围有所不同。选择含有合适 pH 值缓冲系统的培养基,以维持培养过程中 pH 值的稳定。常见的缓冲系统有 CO₂/ 碳酸氢钠、磷酸盐和 HEPES 等。
    • 特殊添加物:根据实验需求,选择含有特殊添加物的培养基。例如,胰岛素可以促进细胞增殖、延长细胞寿命,增加蛋白和核酸的表达量;ITS(胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)可以降低多种细胞常规维持和低密度贴壁培养时所需的胎牛血清浓度。
  4. 参考经验和文献:可以查阅相关的文献资料,了解其他研究者在培养相同或相似细胞时所使用的培养基;也可以咨询有经验的实验室人员,获取他们的建议和经验。
细胞培养时候的注意事项
  1. 培养环境
    • 温度:不同类型的细胞对温度有不同的要求,一般来说,哺乳动物细胞的培养温度为 37℃左右,温度过高或过低都会影响细胞的生长和代谢。在培养过程中,需要确保培养箱的温度稳定。
    • 湿度:适宜的湿度可以防止培养基的蒸发和细胞的干燥。通常培养箱内的湿度应保持在较高水平,一般在 90% 以上。
    • 气体环境:细胞培养需要一定的气体环境,例如 CO₂ 浓度。对于需要 CO₂ 的细胞,培养箱内应提供相应浓度的 CO₂(一般为 5%),以维持培养基的 pH 值稳定。对于一些特殊的细胞,如在无 CO₂ 培养箱中培养的细胞,需要选择适合的培养基和培养方法。
  2. 无菌操作
    • 实验器材消毒:培养细胞所使用的培养瓶、培养板、移液器等器材都需要进行严格的消毒处理,一般采用高压蒸汽灭菌、紫外线照射等方法。
    • 操作过程中的无菌:在进行细胞培养的操作过程中,实验人员需要佩戴手套、口罩、帽子等防护用品,并且在超净工作台或生物安全柜中进行操作,避免细菌、真菌等微生物的污染。同时,操作过程中要避免交叉污染,例如不同细胞系之间的交叉污染、细胞与试剂之间的交叉污染等。
  3. 细胞处理
    • 细胞来源:确保细胞的来源可靠,没有受到污染或损伤。如果是从外部获取的细胞,需要进行严格的检验和鉴定,确保细胞的纯度和活性。
    • 细胞传代:当细胞生长到一定密度时,需要进行传代培养。传代的频率和方法需要根据细胞的类型和生长特性来确定,过度传代或不恰当的传代方法可能会导致细胞的老化、变异或死亡。
    • 细胞冻存和复苏:如果需要长期保存细胞,可以进行冻存。冻存时需要使用合适的冻存液,并按照正确的程序进行冷冻。在复苏细胞时,需要快速解冻,并将细胞转移到合适的培养基中进行培养。
  4. 观察和记录
    • 定期观察:在细胞培养过程中,需要定期观察细胞的生长情况,包括细胞的形态、密度、活力等。通过观察细胞的形态变化,可以及时发现细胞的异常情况,如细胞的变形、死亡、污染等。
    • 记录数据:详细记录细胞培养的过程和结果,包括培养基的配方、培养条件、细胞的生长情况等。这些数据对于分析实验结果、优化培养条件以及后续的实验研究都具有重要的参考价值。


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